Perfektní kombinace
Xiao Xiao získal bakalářské
vzdělání v oboru farmaceutická chemie na Shanghajske universitě v Číně a diplom
v oboru biochemie na universitě ve Wuhanu. V roce 1986 vyučoval biologii na
universitě ve Wuhanu. Jeho cílem ale bylo pracovat na genových terapiích, proto
odešel do USA. Od roku 1988 působil jako vyučující asistent na katedře biologie
na University of Pittsburgh pod vedením virologa Jude Samulski.
Od začátku Xiao
pracoval na různých projektech genové terapie. Ze začátku se účastnil vývoje
virových vektorů, zkoušel zjistit jestli adenovirus je schopen infikovat jak
dělící se tak i nedělící se buňky a kam se vektorem donesena DNA v buňce
dostane. AAV v té době nebyl příliš populární vir. Ne proto, že by to byl
nebezpečný vir ale proto, že nebyl ničím významný. Mezi virology koluje vtip,
že AAV znamená Almost A Virus (skoro vir nebo jako vir), důvodem je to, že
nezpůsobuje žádnou chorobu. A jestliže vir nezpůsobuje žádnou chorobu není
nijak intenzívně studován.
Xiao strávil v
Pittsburku 4 roky, pak rok pracoval v Kalifornii v biotechnologické firmě
Avigen. V roce 1994 přešel do Centra genové terapie na University of North
Carolina, kde opět pracoval se Samulskim. Za další 4 roky odešel zpět do
Pittsburku. “Jakmile jsem se vrátil ihned jsem začal vytvářet svou vlastní
laboratoř”, říká Xiao. “Naučil jsem se hodně o přenosu svalových genů protože
AAV dobře funguje na svalech. Nejdříve jsem pracoval s jedním z genů
způsobujících LGMD kvůli jejich malé velikosti a relativní snadnosti vložení
genů do AAV vektoru. Tato choroba je ale velmi vzácná, narozdíl od DMD, která
je velmi závažná a postihuje spoustu děti.”
Gen pro
dystrofin je příliš velký než aby se vešel do AAV, ale existuje jiné řešení.
Bylo zjištěno, že v dystrofinovém genu se objevuje spousta delecí, které
neovlivňují důležité funkce proteinu dystrofin. Xiaoův tým experimentoval s
umělými delecemi dystrofinového genu když v roce 1997 jeden japonský tým
oznámil, že s “minidystrofinem”, genem, kterému chybí 23 z 24 exonů střední
oblasti genu označované jako rod doména, dosáhli nadějných výsledků u mdx myší.
Když ale Xiaova skupina zkusila zopakovat experiment japonců nedosáhli stejného
terapeutického efektu. Ve snaze odzkoušet nově vyvinutý AAV vektor Xiao s
kolegy začali vytvářet své vlastní minidystrofinove geny.
“Bylo zřejmé, že rod doména nemůže být příliš krátká, pokud byla příliš
krátká ochranná funkce minidystrofinu by se ztratila. Proto jsme udělali naší
novou verzi minidystrofinu s delší rod oblastí” vysvětluje Xiao. “Když jsme
zvětšili rod doménu bylo nám jasné, že budeme muset odebrat něco jiného,
abychom se vešli do AAV vektoru.” Xiao se rozhodl odstranit jinou část genu,
tzv. C terminus.
To nám dalo kapacitu přidat kousek rod domény. Udělali jsme řadu genů s
různou délkou rod domény, vložili do AAV vektoru, otestovali na mdx myších a
zjistili velmi dobré terapeutické účinky řady z nich.
“Po těchto výborných výsledcích ze studií na myších se mne mnoho rodičů
děti s DMD, vědců i lidí z MDA asociace ptalo: “Co bude váš další krok?” Věděli
jsme, že musíme tyto výsledky přenést “z laboratorního stolu k nemocničnímu
lůžku”. To je náš dlouhodobý cíl, samozřejmě to bude ještě náročná práce.”
“Abyste mohli udělat klinický pokus musíte se ucházet o grant, protože
bez dotace to neuděláte. Musíte udělat předklinické pokusy jak vyžaduje FDA.
Musíte jednat s regulačními komisemi a institucemi. Musíte mít virový vektor v
kvalitě vyžadované pro klinické pokusy. Samozřejmě, stejně jako v jiných
farmaceutických pokusech musíte mít lék.
Proto se Xiao opět spojil se Samulskym jehož laboratoř v Chapel Hill už
vyráběla AAV vektory v potřebné kvalitě pro pokusy s Canavasovou chorobou.
“Samulski pracoval na AAV poté co absolvoval školu tak jako já. Říkal, že chce dostat
tuto technologií genové terapie na kliniky k čemuž měla sloužit nově založená
biotechnologická firma Asklepios. Genová terapie svalové dystrofie se perfektně
hodila pro tento účel. Věděli jsme, že náš dystrofin a jeho firma vlastnící
potřebnou vývojovou a produkční technologií by mohla být perfektní kombinace.
Tak jsme začínali.”
Translated and posted with
permission of the Muscular Dystrophy Association of the United States
Přeloženo a zveřejněno se
svolením Muscular Dystrophy Association USA