Výzkum 2006

31.12.2006

• Shrnutí důležitých výsledků výzkumu v období mezi červencem a prosincem 2006
         Guenter Scheuerbrandt vypracoval zprávu o pokroku ve vývoji léku pro DMD/BMD za druhý půlrok 2006, její překlad najdete zde.
• Deset nejlepších vědeckých prací týkajících se léčby DMD/BMD za rok 2006 
         je seznam deseti nejlepších vědeckých prací v oblasti výzkumu a vývoje léku pro DMD/BMD za rok 2006. Vypracoval jej David Feder, brazilský lékař a otec chlapce s DMD.

12.12.2006

• AVI BioPharma Announces Clinical Development Initiative for Muscular Dystrophy  
         AVI BioPharma zahajuje klinický program pro léčbu DMD s využitím technologie ESPRIT (Exon Skipping Pre-RNA Interference Technology). Klinický program je založen na pozitivním předklinických datech získaných za poslední 2 roky a rozbíhá se ve spolupráci s MDEX konsorciem. Cílem pokusu je ověřit technologii ESPRIT na pacientech. Pokusu se zúčastní 9 pacientů, kteří dostanou nitrosvalově lék AVI-4658 zacílený na exon 51. Po 4-6 týdnech bude provedena biopsie a analyzována přítomnost dystrofinu. V případě pozitivních výsledků bude odzkoušeno systematické doručení léku nitrožilní injekcí. V roce 2007 hodlá AVI BioPharma zažádat FDA o povolení k multicentrické studii v USA, předpokládá se, že tato studie by měla už byla zacílena i na některé další exony.  AVI BioPharma hledá sponzory a spolupráci i v Austrálii a jinde.
• Ex vivo treatment with nitric oxide increases mesoangioblast therapeutic efficacy in muscular dystrophy  
         Ani ne před měsícem byla publikována zajímavá studie o léčbě LGMD psů pomocí kmenových buněk zvaných mezoangioblasty. Teď se objevila nová práce na toto téma. Autoři se zaměřili na zvýšení efektivnosti, pokus provedli na svalových buňkách s chybějícím alfa-sarkoglykanem což je další důležitý protein z dystroglykanového komplexu. Ex vivo odzkoušeli, že mezoangioblasty na které působily předem NO donory daleko snadnějí migrují do dystrofických svalů, snadněji fůzují s myoblasty a vyvíjejícími se svalovými vlákny, produkují víc alfa-sarkoglykanu a lépe odolávají cytotoxickým podnětům podobným těm, které se vyskytují v dystrofickém svalstvu. Takto ošetřené mezoangioblasty by mohly značně zvýšit účinnost léčby. 

18.11.2006

• Protizánětlivé léky pomáhají DMD myším
         "Myši postrádající bílkovinu dystrofin a vykazující příznaky podobné DMD, které dostaly protizánětlivý lék etanercept (Enbrel), byly výrazně chráněny proti poškozování svalů vyvolanému fyzickou zátěží", tvrdí vědci z University of Western Australia v Crawley.
         Stuart Hodgetts a jeho kolegové, kteří publikovali své zjištění v říjnovém vydání časopisu Neuromuscular Disorders, injikovali etanercept dospělým myším vystaveným fyzické námaze po dobu 48 hodin. Pak porovnali vzorky jejich svalů se vzorky od neléčených myší. Svalová vlákna z předních končetin léčených myší vykazovala daleko menší zánět a vyšší schopnost buněk přežít zátěž. Podobných výsledků bylo již dříve dosaženo s jiným protizánětlivým lékem - infliximab (Remicade).
         Autoři tvrdí, že etanercept a infliximab, které jsou povoleny v USA pro jiné nemoci a mají menší vedlejší účinky než kortikosteroidy nyní používané na DMD, by mohly být užitečné "k redukci závažnosti choroby jak u DMD tak u jiných dystrofií". Přesto varují, že "výhodnost použití těchto nebo jiných úzce zaměřených protizánětlivých léků musí být víc ověřena."
• Kmenové buňky úspěšně léčí svalovou dystrofii u psů
         Italští vědci Maurilio Sampaolesi, Guilio Cossu a další z San Raffeale Scientific Institute v Milaně úspěšně léčili psy se svalovou dystrofii odpovídající lidské DMD pomocí kmenových buněk. Použili speciální druh kmenových buněk - mesoangioblasty, které se nachází ve stěnách cév.
         13 psů bylo rozdělených do 3 skupin. První skupina dostala mesoangioblasty od zdravých dárců. Druhá vlastní buňky upravené tak, aby byly schopny produkovat dystrofin. Třetí kontrolní skupina nedosatala nic. Psi, kteří dostali mesoangioblasty od zdravých dárců na tom byli nejlépe, jeden pes byl schopen chodit ještě v 13ti měsících, přitom většina psů má problémy s chůzí po osmém měsíci a umírají kolem jednoho roku.
         "Mnoho terapeutických metod bylo úspěšných na myších", říká Sharon Hesterlee viceprezident MDA, "ale toto je první případ funkčního zlepšení u velkého zvířete s touto chorobou a významný krok k testům těchto buněk na klinikách. Psi v tomto pokusu dostali 3-5 injekcí s asi 50ti miliony buněk v měsíčních intervalech. Buňku byly injikovány do tepen končetin. Některá zvířata dostala také imunosupresiva, ale u žádného z nich nebyla pozorována imunitní reakce.
         "Neni jasné jak dlouho bude trvat než se tento slibný postup dostane na kliniky ale jsme opatrně optimističtí", řekla Valerie Cwik, MDA viceprezident pro výzkum. Fakt, že dystrofin byl efektivně doručen do několika svalů naráz je velmi významný. MDA nyní sponzoruje snahy Cossu izolovat mesoangioblasty z lidských tkání za účelem budoucích pokusů.
  Další články na toto téma:
  • Stem cells treat wasted muscles
  • Stem cells 'treat muscle disease'
  • Stem cells help dogs with dystrophy
  • Světlo naděje v léčbě dystrofie
  Článek MDA nezmiňuje některá další fakta:
  • Neschopnost mesoangioblastů fůzovat s buňkami srdce a regenerovat jej
  • Neschopnost vlastních mesoangioblastů infikovaných genem pro dystrofin odstranit symptomy choroby přestože svalové buňky produkovaly dystrofin
  • Jeden pes při pokusech umřel na selhání srdce
  • U dalšího psa se vyvinuly klinické výrazné klinické příznaky jen pár dní poté co přestal dostávat imunosupresiva, do té doby byl bez symptomů 
  • Cossu našel ekvivalentní typ buněk u člověka a plánuje první experiment na dětech do dvou let


Na obrázku jsou vzorky z biopsie: a) neléčeného psa, b) léčeného psa. Na obrázku b)  je vidět, že svalová vlákna jsou daleko uspořádanější. 

5.11.2006

• Curcumin Attenuates Dystrophic Pathology in mdx Mice through Inhibiting NF-κB Activation
         V abstraktu, který bude přednesen přednesen na 46 výroční konferenci American Society for Cell Biology v San Diegu, čínští vědci publikují zjištění, že přírodní látka kurkumin významně zeslabuje dystrofickou patologii a to prostřednictvím inhibice NF-κB.  
         Mdx myším byl podáván kurkumin v dávce 1 až 10mg. Integrita svalové membrány vyhodnocovaná pomocí Evansovy modři a svalová výkonnost byly výrazně vyšší. Histologická analýza ukázala, že kurkumin snížil odumírání svalových vláken a zvýšil jejich regeneraci. Hodnoty CK, TNF alfa, interleukine-1 beta se po podávání kurkuminu snížily.
         Kurkumin je netoxická látka vyskytující se v rostlině Kurkuma dlouhá (Curcuma longa). Kurkuma dlouhá je rostlina po staletí používaná v lidovém lékařství například při léčbě zánětů jater, žlučníku a žlučových cest, bolestech břicha apod.

22.10.2006

• PTC Therapeutics oznamuje povzbudivé výsledky 2 fáze testů PTC124 u DMD
         PTC Therapeutics, Inc. prezentovala předběžné výsledky 2. kola testů léku PTC124. Langdon Miller, M.D., prohlásil: "Tyto předběžné výsledky testů na pacientech s DMD potvrzují, že PTC124 dokáže vyvolat obejítí nonsense mutace a princip je použitelný pro léčbu této genetické poruchy". 
        Pokusu se zúčastnilo 26 pacientů, lék byl podáván 28 dní. Biopsie potvrdily tvorbu dystrofinu, kvantitativní analýza ale ještě není hotová. Koncentrace CPK byla po dobu léčby výrazně nižší. Řada pacientů vykazovala větší aktivitu a zvýšenou vytrvalost. 
        PTC124 bylo dobře snášeno, Vedlejší účinky se projevily jen u některých pacientů a byly slabé až střední, nevedly k přerušení nebo ukončení léčby, byly reversibilní. Nevyskytly se obavy o život pacientů.
        Všechna data budou k dispozici v první půlce roku 2007, PTC Therapeutics předpokládá, že další kolo pokusů začne během příštího roku.

11.10.2006

• CepTor Reports Two Issues Remain to Move Myodur IND Forward
         Ceptor Corporation opět nedostal povolení začít klinické testy Myoduru. V telekonferenci s FDA mu bylo oznámeno, že ještě zbývají vyřešit dva problémy.
         Péče byrokratů o zdraví těžce a zatím neléčitelně nemocných dětí je opravdu dojemná ...

8.10.2006

• Update on Exon Skipping
  PPMD vydal o víkendu toto prohlášení:
         "Judith van Deutekom, Prosensa a LUMC Leiden na konferenci World Muscle Society v belgických Bruggách prezentovali předběžné výsledky probíhajících klinických testů s AONy.
         První pacienti dostali vnitrosvalové injekce AONů pro exon 51. Biopsie provedené měsíc po injekci prokázaly přítomnost zkráceného dystrofinu. V současnosti už 3 pacienti dostali injekci AONů, žádné vedlejší účinky nebyly pozorovány.
         Ačkoliv v dalších měsících bude víc informací, předpokládáme, že první výsledky uvítáte."
• Drug may help treat muscular dystrophy
• Angiotensin II Type 1 Receptor Blockade Improves TGF beta-induced Failure of Muscle Regeneration in the mdx Mouse Model of Duchenne Muscular Dystrophy
         Oba články pojednávají o testu léku na vysoký krevní tlak losartanu na mdx myších. Po šesti měsících léčby vědci ověřili svalovou výkonnost myší. Léčba losartanem vedla k výraznému zvýšení výkonnosti a snížení únavy svalů při námaze v porovnání s neléčenými vrstevníky. Vědci předpokládají, že svalové poškození u DMD a Marfanova syndromu je zhoršováno tím, že kmenové buňky nejsou schopny opravit poškozené svalové buňky. To je způsobeno velkým množství bílkoviny označované TGF-beta. Toto je první jasný důkaz toho, že přerušení TGF-beta signalizace v případě selhávající regenerace způsobuje lepší regeneraci svalů.
         Losartan funguje podobně jako ACE inhibitory, které jsou doporučovány jako prevence i léčba srdečních disfunkcí u chlapců s DMD starších jak 10 let, a eventuelně po poradě s kardiologem a/nebo neurologem je může nahradit. Losartan je starý, levný, často předepisovaný lék na vysoký tlak, vedlejší účinky nejsou časté, můžou to být závratě, chvilkové ztráty vědomí např. při prudkém vstanutí, průjem, svalové křeče, nespavost, záněty dýchacích cest, nepravidelný tep. Tyto příznaky jsou obvykle dočasné.

24.9.2006

• Experimental Cancer Drugs Counter Muscle Deterioration Seen in Muscular Dystrophy 
         S průlomovou prací v oblasti regenerace dystrofického svalstva přišel tým vedený Pierem Purin z Burnham Institute v kalifornské La Jolla. V pokusech, které provedli, zjistili, že u 12 týdnů starých myší s jasně viditelými projevy dystrofie je možno pomocí inhibitorů deacetyláz dosáhnout během tří měsíců svalové výkonnosti srovnatelné se zdravými myšmi a to i bez odstranění genetické příčiny choroby. Současně bylo pozorováno, že došlo i k výrazným morfologickým změnám ve svalech směrem k normálnímu svalstvu. Podobných výsledků bylo dosaženo i u myších modelů LGMD. Výborný článek na toto téma vyšel dokonce i v českých médiích, konkrétně na Oslovi, článek najdete zde.
         V současnosti je inhibitor deacetyláz vyvíjen firmou Merck jako lék proti některým typům rakoviny a pod názvem Zolinza je v závěrečné fázi schvalovacího řízení u FDA. Předpokládá se, že by do konce roku mohl být na trhu.
         To ale neznamená, že jej bude možno příští rok nasadit i pacientům se svalovými dystrofiemi. Před tím bude nutno provést řadu studií, zejména toxikologických, protože protirakovinné léky jsou jednak "přirozeně" toxické jednak se u nich nepředpokládá trvalé užívání. Problém dlouhodobého užívání by pro DMD mohl odpadnout v okamžiku kdy budou k dispozici genetické léky odstraňující příčinu. Dále, průběh DMD je u myší mírnější než u lidí, proto se předpokládá, že bude nutno takovéto studie provést také na dystrofických psech u nichž průběh choroby daleko víc odpovídá průběhu DMD u člověka a bude z nich jasnější jak moc půjde regenerovat lidské dystrofické svalstvo.
         Přes všechny tyto výhrady studie znamená velký pokrok v hledání léčby svalových dystrofií protože dokazuje, že i dystrofií výrazně poškozené svalstvo je možno značně zregenerovat.

17.9.2006

• CepTor Seeks Approval to Initiate Clinical Trial of Myodur for Muscular Dystrophy; Submits IND Complete Response to FDA
         Biofarmaceutická firma CepTor Corporation vyvíjející lék na bázi kalpain inhibitoru oznámila, že 29.8.2006 poslala FDA doplňující podklady, které si FDA vyžádala. Na základě PDUFA legislativy je FDA povinna odpovědět do 30.9.2006. Doufejme, že CepTor dostane povolení a dlouho očekávané klinické testy Myoduru budou moct konečně začít.

6.9.2006

• Interview s profesorem Stephen D. Wiltonem
         Ve dnech 13.-16. července proběhla Cincinnati výroční konference PPMD. Na této konferenci poskytl profesor Wiltom interview Dr. Scheuerbrandtovi. Jeho překlad najdete zde. 

23.7.2006

• Tři laboratoře shledaly minidystrofinový gen efektivní
         Dobré zprávy ohledně miniaturizového ( mini- a mikro- ) dystrofinového genu přichází z tří laboratoří podporovaných MDA. Dystrofinový gen obsahuje instrukci pro tvorbu bílkoviny dystrofin, která chybí u chlapců s DMD. Dystrofinový gen je příliš velký a vyžaduje zmenšení než jej bude možno použít pro genovou terapii. Miniaturizace je process při kterém je vytvořena zmenšená molekula dystrofinu. Nové strategie jako je třeba "exon skipping", které přimějí svalovou buňku přeskočit úsek genetického kódu s chybou, take vedou na tvorbu zkrácené formy dystrofinu.
         Dongsheng Duan z University of Missouri-Columbia a Jeffrey Chamberlain z University of Washington in Seattle prokázali, že mikrodistrofinový gen postrádající instrukci pro tzv. C terminal umístěný na jednom konci dystrofinu a část střední sekce nazývané rod domain je schopna efektivně léčit myši s vážnou poruchou připomínající DMD.
  
  
  
         Duanova skupina, která publikovala své výsledky v Molecular therapy, vložila mikrodystrofinový gen vyvinutý v Chamberlainově laboratoři do transportního prostředku vytvořeného z AAV viru. Potom jej injikovali do svalů nohou myší postrádajících jak dystrofin tak utrofin. U těchto double knockout myší (myši s poškozeným genem jak pro dystrofin tak pro utrofin) se vyvíjí svalová dystrofie daleko více připomínající lidskou DMD než je běžné u myší postrádajících jen dystrofin. Duanova skupina zjistila, že nový gen zabraňuje zánětu a následnému zjizvení v léčených svalech, zvyšuje svalovou výkonnost, redukuje poškození vyvolané kontrakcemi a obnovuje tvorbu membánového komplexu bílkovin na správném místě. Silně zkrácený gen umožňuje syntrophinu a dystrobrevinu, což jsou proteiny u nichž se předpokládá, že přenáší signály do svalů, zaujmout své místo u svalové membrány.
         Chamberlainova skupina šla ještě o krok dále a podala zmenšený gen double knockout myším, pro přenos také použili AAV vir ale lék podali nitrožilně. Své výsledky publikovali na konferenci New Directions in Skeletal Muscle Biology, která se konala v letos v dubnu v Dallasu. Ve zprávě z této konference tvrdí, že pozorovali dystrofin jak v končetinách tak v dýchacím svalstvu, dále zjistili zlepšenou funkci svalů a delší životnost u léčených myší v porovnání s neléčenými.
         Toto jaro vědci spolupracující s laboratoří Roberta White z University of Missouri-Kansas City a Stephen Hauschka z University of Washington použili úplně jiný typ mikrodystrofinového genu a zjistili, že i ten přináší výrazné zlepšení. Tento tým vypěstoval double knockout myši, které produkovaly ve svalstvu formu dystrofinu, která se normálně nachází jen v oční sítnici. Tato forma dystrofinu označovaná Dp260 postrádá N terminál, na druhém konci C terminál a kousek střední části bílkoviny. Tento tým oznámil, že u myší s Dp260 ve svalech se vyvinula jen velmi mírná forma dystrofie, vyrostly a vážily normálně, zakřivení páteře bylo srovnatelné se zdravýma myšima narozdíl od double knockout myší u kterých se vyvinulo výrazné zakřivení páteře. Dp260 myši take žily výrazně déle.
         Z těchto výsledků vyplývá, že k obnově správné buněčné funkce jsou nezytné dva faktory: dystrofinová doména, která dystrofin váže k bílkovině dystroglykan ve svalové membráně, a alespoň část rod domény.
  Převzato z : Quest, Volume 13, Number 4, JULY/AUGUST 2006: Three Labs Find Microdystrophin Genes Effective
  

14.7.2006

• Vastox recieves positive orphan drug designation opinion from the EMEA for its DMD therapy
         Firma Vastox vyvíjí 
• Santhera vyvíjí lék pro Duchenneovu svalovou dystrofii

5.7.2006

• Co můžeme udělat pro naše nemocné děti a co už nedokážeme
• Santhera vyvíjí lék pro Duchenneovu svalovou dystrofii

26.6.2006

• New Step Toward Treatment For Duchenne Muscular Dystrophy
         Dr. Tremblay a jeho tým dosáhli dalšího pokroku ve vývoji buněčné terapie pro DMD. Devíti pacientům s DMD injikovali myoblasty zdravých jedinců do asi 1cm krychlového svalu. U osmi z nich bylo v tomto místě nalezeno 4%-26% svalových vláken schopných produkovat dystrofin. K obnovení tvorby dystrofinu dochází poté co myoblasty splynou se svalovými vlákny a předají jim funkční gen pro dystrofin. Na základě tohoto výsledku Dr. Tremblay dostal povolení k dalším klinickým pokusům. V nich bude pacientům implantováno 300 milionů buněk do předloktí. Těmto pacientům bude měřena výkonnost svalů předloktí před transplantací a pak 3 a 6 měsíců po transplantaci. Cílem bude vyhodnotit jak takováto transplantace ovlivní výkonnost svalů.
         V současnosti Dr. Tremblay hledá 10 dobrovolníků starších 18ti let s DMD nebo BMD. Pacienti se zájmem o účast v tomto klinickém pokuse jej mohou kontaktovat prostřednictvím svého neurologa. Ze zprávy není jasné jestli se tato výzva týká jen Kanadských pacientů nebo i zahraničních.

25.6.2006

• Ceptor Corp, Quarterly Report, 22.5.2006 
         Biotechnologická firma Ceptor Corporation pracuje na léku pro DMD na bázi kalpain inhibitoru s názvem Myodur. Započetí klinických pokusů s Myodurem bylo slibováno nejdříve na začátek roku 2006, později na druhý kvartál 2006. Podle nedávno zveřejněné čtvrtletní zprávy se start klinických pokusů odsouvá na konec roku 2006. Firma se dostala do finančních potíží, navíc FDA vyžaduje další podklady než dá svolení začít klinické testy. To znamená, že momentálně není jisté jestli Ceptor Corp bude vůbec schopen ve vývoji Myoduru pokračovat. Vše teďzávisí na tom jestli se Ceptoru podaří najít domácího nebo zahraničního partnera, který by pomohl testy zafinancovat.

12.6.2006

• Exploring the Frontiers of Therapeutic Exon Skipping for Duchenne Muscular Dystrophy by Double Targeting within One or Multiple Exons
• Induction of revertant fibres in the mdx mouse using antisense oligonucleotides, celý článek v pdf formátu zde
         Australané a Holanďané pracují na vylepšení metody exon skipping tak, aby ji bylo možno využít pro co nejvíce pacientů. Za použití kombinace dvou AONů se jim podařilo dosáhnout odstranění exonů 47 a 57, které jsou pomocí jednoho AONu neodstranitelné. V současnosti se zkouší kombinace různých typů AONů tak, aby bylo možno vyvolat rozsáhlé delece o kterých je známo, že vedou na mírné formy BMD. Jde například o delece exonů 17-51, 42-55 a 45-59. Tato metoda využívající kokteilu AONů se nazývá multiexon skipping a má tu výhodu, že je schopna převést na BMD nejen delece ale i bodové mutace a inserce, které jsou v této oblasti dystrofinového genu a které pomocí jednoho AONu nelze léčit. Multiexon skipping umožňuje léčit různé typy poruch v příslušné oblasti genu pomocí jednoho kokteilu AONů což by mohlo přinést časovou a finanční úsporu ve fázi komercializace léku a pokrýt větší skupinu pacientů.

6.6.2006

• Abstrakty, které byly prezentovány na devátém výročním zasedání Americké společnosti pro genovou terapii
         Na právě zkončeném devátém zasedání Americké společnosti pro genovou terapii v San Diegu bylo předneseno 30 referátů týkajících se přímo či nepřímo DMD. Většina prací se zabývala optimalizací vektorů pro přenos dystrofinového genu ( jak jejich schopností pronikat do svalových buněk tak i zvětšováním jejich kapacity aby byly schopny unést co největší část dystrofinové cDNA), optimalizací minidystrofinu, vylepšováním a ověřováním efektivnosti různých AONů a U7 snRNA určených k odstranění nevhodných exonů, vylepšováním buněčných terapií. Žádná z prací ale nepřináší zásadní, průlomové řešení.
• Interview s Geraldem Platenburgem
         Výkonný ředitel firmy Prosensa Gerald Platenburg poskytl v souvislosti se startem prvního kola klinických testů AONů pro léčbu DMD interview. V něm fakticky zopakoval to co bylo již řečeno v tiskovém prohlášen. Nové informace přínáší pouze odpověď na poslední otázku "Co bude dál a kdy". Jeho odpověď je : "Budoucí plány zahrnují systematické doručování AONů. Právě probíhají diskuse o sytematických testech týkajících se vynechání exonů 46 a 51. Doufáme, že se každého testu zúčastní 10-12 pacientů. Kandidáti budou vybráni z celého světa na základě mutace. Ještě není jasné jestli klinické testy proběhnou na jednom nebo více místech. Všichni doufáme, že systematické testy začnou ještě před koncem roku 2006, zatím ale ještě nebyla poslána regulačním úřadům písemná žádost. Z tohoto důvodu je nemožné říct přesné datum a místa kde testy proběhnou. Výběr pacientů pro testy je založen na specifických výběrových kritériích a každé místo kde testy proběhnou bude zodpovídat za to, že kandidáti splní tato kritéria, vyjádří ochotu účastnit se a podepíší informovaný souhlas. Žádna organizace jako je třeba PPMD ani Prosensa nebude mít jakýkoliv vliv na výběr kandidátů."

11.5.2006

• Prosensa and LUMC get approval for in-human trial for 'smart therapy' to cure Duchenne Muscular Dystrophy
         PPMD právě vydalo toto tiskové prohlášení :
         8.5.2006 holandská CCMO (Netherlands Central Committee on Research involving Human Subjects) a IRB LUMC (Medical Ethics Committee Leiden university medical center - čili medicínsko etická komise Leidenské university) povolili holandské biotechnologické firmě Prosensa a LUMC uskutečnit test efektivnosti, bezpečnosti a tolerance jedné nitrosvalové injekce AONů určených k obnově dystrofinu, což je bílkovina chybějící u pacientů s DMD. Tento první test na lidech používající AONy k odstranění nechtěné části poškozeného genu reprezentuje významný krok směrem k vývoji efektivní terapie pro DMD. Test poskytne důležitý důkaz funkčnosti principu, který je nezbytný pro další studie založené na systematickém doručení léku do celého těla.
        " Jsme nesmírně šťastni, že máme povolení pro tuto studii. Doufáme, že začneme příští měsíc, další informace poskytneme včas. Máme všechny důvody věřit, že tento pokus prokáže terapeutický potenciál našeho léku a tím položí základ pro léčbu této strašné nemoci", říká Gerald Platenburg, výkonný ředitel CEO.
        " Strávili jsme 5 let výzkumem v laboratoři a na zvířatech a úspěšně dokončili všechny přípravné práce. Nyní přichází okamžik, kdy uvidíme jestli naše snaha o obnovu tvorby defektního proteinu u pacientů bude úspěšná", říkají Dr. Judith van Deutekom, Dr. Jan Verschuuren a prof. Dr. Gertjan van Ommen, vedoucí vývoje a vedení LUMC.

5.5.2006

• European Human Genetics Conference 2006
         Ve dnech 6.-9.5.2006 se koná v Amsterdamu výroční konference Evropské společnosti pro humánní genetiku (European Society of Human Genetics). Abstrakty prací týkající se DMD, které mají být předneseny, najdete zde.
  Pro nás jsou zajímavé dvě z nich :
  • Advances in exon skipping trial development towards proof-of-concept and systemic application in Duchenne Muscular Dystrophy
    Zpráva potvrzuje, že v první polovině roku 2006 má dojít k ověření funkčnosti AONů zacílených na exon 51 na pacientech s DMD. Dále se zmiňuje o vytvoření vysoce citlivého testu nazvaného ELISA, který umožňuje vyhodnotit množství a stabilitu AONů v různých orgánech a tkáních. Za použití ELISY bylo zjištěno, že "poločas rozpadu" AONů ve svalech je v průměru 10 dní.
  • Preimplantation genetic diagnosis for Duchenne muscular dystrophy (DMD) by fluorescence in situ hybridization (FISH)
    Zpráva popisuje případ PGD (preimplantační genetické diagnostiky) provedený FISH (fluorescence in situ hybridization) metodou v brněnské Dětské fakultní nemocnici. Zákrok podstoupila zdravá přenašečka DMD s delecí exonů 45-50 na jednom z X chromozomů. Ze sedmi embryí byla odebrána buňka, čtyři z nich byly analyzovány FISH metodou na přítomnost exonů 46 a 47. Dvě z analyzovaných byla chlapecká embrya s delecí, jedno holčička s delecí na jednom z X chromozomů a jedno embryo byl zdravý chlapec. To bylo transferováno.

23.4.2006

• Oral glutamine and amino acid supplementation inhibit whole-body protein degradation in children with Duchenne muscular dystrophy
         Tato studie zkoumala vliv glutaminu (0,5g/kg/den) nebo směsi aminokyselin (0,8g/kg/den) na metabolismus pacientů s DMD. Při užívání delším jak 10 dní bylo zjištěno, že jak glutamin sám tak směs aminokyselin výrazně snižují proces odbourávání proteinů v těle. 
• Oxandrolone enhances skeletal muscle myosin synthesis and alters global gene expression profile in Duchenne muscular dystrophy
         V minulosti provedené studie ukázaly, že neúprosně postupující ztráta svalů u DMD souvisí i s nepoměrem mezi tvorbou a odbouráváním svalových bílkovin. Ačkoliv předchozí studie naznačily, že oxandrolone by mohl mít  pozitivní vliv na pacienty s DMD, mechanismus působení nebyl jasný. Tato studie ukázala, že oxandrolone má výrazný anabolický efekt na klíčové bílkoviny podílející se na stažení svalu. Další a rozsáhlejší studie jsou potřeba na to, aby se ukázalo jestli tyto změny ve svalovém metabolismu mohou vást k účinné terapii.
• Systemic administration of IGF-I enhances oxidative status and reduces contraction-induced injury in skeletal muscles of mdx dystrophic mice
        Absence dystrofinu má za následek rozpad dystrofin-glykoproteinového komplexu jehož důsledkem je velká náchylnost svalů k poškození při námaze. Strategie redukující náchylnost svalu k poškození jsou velmi důležité protože tento způsob poškození svalů velmi přispívá k rozvoji choroby. U transgenních mdx myší větší produkce IGF-I (inzulin-like growth factor I) vede k hypertrofii svalových vláken a k jejich zvýšené výkonnosti. Naproti tomu pravidelné podávání IGF-I (1-1,5mg/kg/den) mdx myším vedlo k změně fenotypu směrem k odolnějšímu vůči námaze, ale beze změny v množství svalstva nebo jeho výkonnosti. Tyto výsledky jsou dalším dokladem toho, že IGF-I by mohl zlepšit funkčnost dystrofického svalstva.

11.4.2006

• Abstract submissions to News Directions in Biology and Disease of Skeletal Muscle, April 23-26, Dallas, Texas
         Odkaz obsahuje abstrakty prací, které budou předneseny na konferenci týkající se nových poznatků ohledně biologie a chorob kosterního svalstva. Pro nás je zajímavých pár přízpěvků :
  • Towards Clinical Studies on Antisense-mediated Exon Skipping in Duchenne Muscular Dystrophy
    Tento příspěvek Judith van Deutekom se týká pokroku v oblasti metody exon skipping. Říká, že v první polovině roku 2006 proběhne první ověření bezpečnosti a efektivnosti AONů na skupině pacientů s DMD a to formou nitrosvalové injekce. Kromě toho pokračují práce na bezpečné a efektivní metodě systematického doručení AONů do svalů. Na mdx myších bylo dosaženo produkce dystrofinu ve všech svalech včetně srdce a bránice a to až na úroveň 45% v porovnání s normální hladinou. To bylo provázeno sníženou hladinou CPK a zlepšenou svalovou výkonností. Také byla zjišťována stabilita AONů v různých orgánech a tkáních. Bylo zjištěno, že poločas přežití v kosterním svalstvu je asi 10 dní.
  • Evaluation of the olopatadine effect in the dystrophinopathy progression in mdx mice submitted to physical activity
    Brazilský tým z Muscular Dystrophy Research Center přišel s objevem, že H1-histamin antagonista olopatadine mimo jiné snižuje průnik Ca2+ do dystrofických svalů. Mdx myši léčené olopatadine vykazovaly zlepšení svalové výkonnosti, snížené množství zánětlivých a nekrotických míst. Další analýzy právě probíhají. Histamin je látka vznikající z aminokyseliny histidinu. Vyskytuje se nejvíc v bílých krvinkách, ale může v menším množství být i v jiných orgánech. K jeho nadměrnému uvolňování dochází při alegrických reakcích a způsobuje např. zúžení průdušek při astmatu nebo kopřivku. Dále se uplatňuje i při vzniku zánětu a zvyšeje též vylučování žaludeční šťávy. Potlačení jeho působení je součástí léčby alergických stavů (antihistaminika H1) a žaludečních vředů (antihistaminika H2). Olopatadine je například součástí některých kapek do očí používaných při alergiích.
  • Muscle-derived nitric oxide modulates adult neurogenesis in the brains of mdx mice
    DMD pacienti často trpí sníženými poznávacími schopnostmi a nižším IQ. Mechanismus jak k tomu dochází ale není jasný. Problémy s učením dobře korelují s poruchami neurogeneze v části mozku zvané dentate gyrus (DG), která může být způsobena NO. NO není jen lokální signální molekula, může mít i komplexní regulační účinky z čehož plyne, že může regulovat neurogenezi i u dospělých lidí. U DMD pacientů je aktivita svalově-specifických nNOS snížená o 80%. Podobnou redukci NOS aktivity a poruchy učení vykazují i mdx myši. "Proto jsme předpokládali, že redukce tvorby svalové NO způsobuje defekt v neurogenezi DG mdx myší. Zjistili jsme, že u mdx myší dochází k zvýšené proliferaci a snížené diferenciaci neuronů v DG. To může být upraveno a to až na úroveň normálních myší svalově-specifickými nNOS."

  30.3.2006

  • First clinical trial of gene therapy for muscular dystrophy now under way
  • Boy, 8, is pioneer for gene therapy
           28 března začal pod vedením Dr. Jerry R. Mendella v Columbus Children's Hospital, Ohio první klinický pokus s genetickou léčbou DMD v USA. Cílem je ověřit bezpečnost a účinnost nově vyvíjeného léku Biostrophin, což je miniaturizovaná verze genu pro dystrofin "zabalená" do AAV viru místo jeho původního obsahu. V tomto pokuse 6 chlapců s DMD dostane 3 injekce Biostrophinu do jednoho bicepsu a 3 injekce placeba do druhého. Ani lékař ani pacienti nebudou vědět do kterého svalu pacient dostal lék. Po několika týdnech bude provedena analýza svalů a zjišťována produkce dystrofinu. V tomto pokusu nejde ještě o léčbu DMD ale ověření bezpečnosti a účinnosti léku a proto se nepředpokládá zlepšení zdravotního stavu pacientů. Přesto by ke zlepšení výkonnosti bicepsu mohlo dojít.
           Lék po 2 desetiletí vyvíjely týmy, které vedou Dr. Richard Jude Samulski a Dr. Xiao Xiao. Poslední 2 roky pracovaly jejich týmy 12-15 hodin denně 7 dní v týdnu, aby se Biostrophin mohl odzkoušet co nejdříve na lidech. Při prezentaci v den zahájení pokusu předvedli video kde ukázali hlodavce před a po léčbě Biostrophinem. Mdx myši před léčbou byly shrbené a pomalu se šouraly. Měsíc poté co jim byl podán lék se čile pohybovaly po klecích a vzpínaly po bocích. Dystrofičtí křečci po léčbě byli schopni držet krok se zdravými křečky při běhu v kole.

  14.3.2006

  • Evoluce viru ve zkumavce aneb o tom, co by teroristé neměli číst
           V současnosti je velkým problémem genových terapií vhodná metoda doručení genu do správných buněk v dostatečném množství. Zajímavý pokus provedl David Schaffer, docent na UC Berkely. Jím vymyšlený a odzkoušený postup by relativně rychle mohl vést k vytvoření vhodného vektoru pro přenos genů. Originál zde.

  27.2.2006

  • Abstrakty, které budou prezentovány na 58 výročním zasedání American Academy of Neurology v San Diegu ve dnech 1-8.4.2006
    Na tomto zasedání bude předneseno pár příspěvků týkajících se DMD. Nejdůležitější informace pro nás jsou tyto :
    • CINRG (The Cooperative International Neuromuscular Research Center) provedl studii v které se ověřovala hypotéza předpokládající, že lék Oxatomide by mohl mít pozitivní vliv na DMD. To nebylo prokázáno.
    • CINGR dále ověřoval účinek koenzymu Q10 na svalovou výkonnost chlapců s DMD léčených steroidy. Bylo zjištěno, že Q10 pozitivně ovlivňuje svalovou výkonnost řady svalových skupin. Největší účinek měl na ohýbače/natahovače lokte, naopak prakticky žádný na svaly, které ohýbají nebo natahují nohy v koleni.
    • Jedna studie se zabývá ověřením jestli užívání kortikosteroidů neovlivní léčbu pomocí rAAV nesoucí gen pro minidystrofin. Studie nezjistila jakoukoliv toxicitu nebo cytotoxicitu genové léčby při současném podávání Prednisolone u mdx myší. Předpokládá se, že vzhledem k tomu, že přibližně 50% pacientů s DMD dlouhodobě užívá steroidy, budou regulační orgány vyžadovat takovouto studii před tím než udělí souhlas k experimentální genové léčbě.

  18.2.2006

  • Persistent and improved functional gain in mdx dystrophic mice after treatment with L-arginine and deflazacort
           Tento experiment zjišťoval jestli léčba mdx myší pomocí deflazacortu a L-argininu (substrát pro NO syntázy, NOS) může změnit rozsah poškození svalových vláken. Dystrofické myši byly rozděleny do několika skupin. První skupina dostávala placebo, druhá deflazacort, třetí deflazacort a L-arginin, čtvrtá N(G)-nitro-L-arginin metyl ester (NOS inhibitor). Takto byly myši léčeny 3 týdny. Dle předpokladu největšího účinku bylo dosaženo při léčbě deflazacortem a L-argininem. Tato léčba nejlépe chránila svaly končetin před poškozením vyvolaným námahou a následnou regenerací a zlepšila vytrvalost v běhu a to i přesto, že v porovnání se skupinou, která dostávala placebo, vzrostla těsně po výkonu permeabilita membrány.

  16.2.2006

  • Report of the Monaco Round Table January 14th 2006
           Nick Catlin z britského PPUK se účastnil setkání pořádaného 14.12006 v Monaku jehož tématem byla metoda exon skipping a její využití pro léčbu DMD. Pro PPUK sepsal z tohoto jednání zprávu jejíž zjednodušený překlad přinášíme zde.

  29.1.2006

  • Early Diagnosis, Treatment Improve Cardiac Outlook in Duchenne, Becker MDs
           Výzkumný tým z Baylor College of Medicine a Children's Hospital v Texaském Houston zjistil, že včasné diagnostikování a léčba nejčastější srdeční poruchy u pacientů s DMD/BMD - dilatace - může zdravotní stav výrazně zlepšit. Tato studie potvrzuje výsledky francouzské studie publikované vloni (informaci o tomto výzkumu jsme na našich stránkách zveřejnili 16.4.2005).
           Studie se zúčastnilo 62 chlapců s DMD a 7 s BMD. Z toho u 31 chlapců echokardiogram ukázal abnormality. Průměrný věk byl 15 let, nejmladšímu bylo 10 let. Tito chlapci dostali ACE inhibitory. Ti z nich, u nichž nedošlo ke zlepšení po 3 měsících, dostali navíc beta blokery. ACE inhibitory snižují tlak jenž musí srdce při pumpování krve přemáhat, beta blokery snižují tepovou frekvenci.
           Za tři roky léčby došlo u 27 chlapců z 29 (93%) ke zlepšení nebo alespoň ke stabilizaci. U 8 DMD pacientů došlo ke zlepšení, tj. přiblížení se k normální velikosti srdce, 19 chlapců (16 DMD, 3 BMD) mělo normální velikost srdce. U dvou chlapců s DMD za sledované období nedošlo k zhoršení srdeční činnosti.
           Tato studie dokazuje, že včasné diagnostikování a léčba nebo preventivní nasazení léků mohou vyrázně oddálit vznik srdečních problémů.
    
  • Heart Damage Varies With Dystrophin Mutation
           Baylorská studie zabývající se ACE inhibitory a beta blokery zjistila také, že u některých mutací je větší pravděpodobnost vzniku srdečních poruch. Vědci zjistili, že srdeční problémy se vyskytují nejčastěji u pacientů s mutacemi v oblasti exonů 12, 14-17 a 31-42. Naopak pravděpodobnost vzniku srdečních poruch u chlapců s mutacemi v exonech 51, 52 byla nižší. Vědci ale upozorňují, že tyto výsledky je ale nutno brát s rezervou protože počet sledovaných chlapců byl příliš malý na to, aby výsledky bylo možno považovat za dostatečně průkazné.
  
  

  11.1.2006

  • MDA Grantee Receives NIH Pioneer Award
           Thomas Rando, vědec sponzorovaný MDA, mimořádný profesor na Katedře neourologie Stanfordské University v Kalifornii obdržel cenu Pioneer Award za rok 2005 od amerického National Institutes of Health. Tuto cenu dostávají výjmečně kreativní vědci, kteří přichází s novými řešeními nejvýznamnějších biomedicínských problémů. Takovýchto cen bylo v roce 2005 rozdáno 13. Tato cena může dosáhnout výše až 500.000,-USD ročně a může být přidělena až na 5 let.
           Rando pracuje na genové terapii pro DMD, která se obejde bez virových vektorů, a na opravě a regeneraci tkání pomocí kmenových buňek.
    
  • Green tea extract and its major polyphenol (-)-epigallocatechin gallate improve muscle function in a mouse model for Duchenne muscular dystrophy
           Švýcarští vědci přinesli další důkaz, že zelený čaj pomáhá zlepšit funkčnost dystrofických svalů - přinejmenším u mdx myší. V pokuse dostávaly mdx myši v potravě výtažek ze zeleného čaje, jeho důležitou složku epigallocatechin gallate a pentoxifylline. U myší, které dostaly výtažek z čaje nebo epigallocatechin gallate, bylo pozorováno zpomalení nekrózy svalstva a změna směrem k silnějšímu a odolnějšímu fenotypu.
  
  

  7.1.2006

  • Integration Into Chromosome Enhances Dystrophin Gene Therapy in Mice
           Vědci ze Stanfordské univerzity podporovaní americkou MDA oznámili, že v experimentech na myších dosáhli vynikající produkce a distribuce bílkoviny dystrofin. Vědci použili novou techniku u které potřebný gen je injikován do svalu bez použití virových vektorů ale zato s dalším genem, který je schopen připojit nový gen k chromozomům.
           Thomas Rando, mimořádný profesor na Stanford's Department of Neurology and Neurological Sciences, injikoval svaly nohou mdx myší s genem pro bílkoviny dystrofin, který chybí pacientům s DMD, a integrase, který dokáže napojit genetický materiál na chromozomy místo aby zůstaly odděleně v jádře buňky. Svaly myši, které dostaly geny jak pro dystrofin tak pro integrázi, obsahovaly po šesti měsících po injekci 8x větší množství dystrofinu než myši, které dostaly samotný  dystrofinový gen. Navíc zatímco svalová vlákna myší, které obdržely jen dystrofinový gen, obsahovala dystrofin jen v bezprostřední blízkosti místa vpichu, vlákna, která obdržela oba geny produkovala dystrofin po celé délce vlákna.
           Svaly myší byly podrobeny i testu propustnosti pro modré barvivo. Zdravé svalové buňky nepropouští toto speciální modré barvivo zatímco buňky bez dystrofinu ano.  U myší, kterým byly podány oba geny, se zabarvilo modře jen malé množství svalových vláken zatímco u myší, které obdržely pouze dystrofinový gen, se zabarvilo velké množství vláken. Podle Randa je distribuce dystrofinu po celé délce vlákna důležitým faktorem pro jakoukoliv techniku doručení genu. Nezáleží totiž jen na množství dystrofinu ale i na tom, kde se pak v buňce nachází. 
           Idea integrace genu je krokem vpřed směrem k bezvirové genové terapii. Je ale nutno si uvědomit, že tato metoda sebou nese riziko integrace na nevhodné místo, což může vést k nežádoucí genetické mutaci. Další vývoj této metody vyžaduje vytvoření specifické integrázy, která by dokázala zajistit připojení genu vždy ve stejném místě. Vědět, kde gen je, vědět, že je to bezpečné místo a dosáhnout vysoké úrovně produkce dystrofinu jsou základní cíle.
  
  
  

  Archiv: 2003,   2004,   2005,   2006,   2007,   2008,   2009,   2010,   2011,   2012,   2013,   2014.

  © 2014 Parent Project - Česká republika, e-mail: parentproject@parentproject.cz