Výzkum 2008

20.12.2008

• A deficit of brain dystrophin impairs specific amygdala GABAergic transmission and enhances defensive behaviour in mice
         Je známo, že některé isoformy dystrofinu jsou produkovány v mozku ale jejich role stále není objasněna. Ví se, že pacienti s DMD mají větší sklony k autismu, pocitům úzkosti, depresím, sebepodceňování, hypochondrii a horší schopnost adaptace v novém prostředí. Ale při patologickém vyšetření mozek pacientů s DMD nevykazuje žádné abnormality.
         V této studii japoští vědci zjišťovali vliv absence dystrofinu v mozcích mdx myší na jejich chování v porovnání se zdravými myšmi, mapovali jeho produkci v jednotlivých oblastech mozku a zjišťovali změny v chování mdx myší, kterým byly podávány AONy. Na základě rozsáhlých pokusů došli k těmto závěrům:
  1. mdx myši daleko víc reagují na ohrožení než normální myši obranným ztuhnutím z kterého se probírají za delší dobu. Za toto jednání je zodpovědná oblast mozku zvaná amygdala. Je to stejná oblast mozku jako ta, která je u člověka zodpovědná mimo jiné za emocionální reakce a produkci stresového hormonu.
  2. Léčba mozku pomocí AONů vedla k částečnému obnovení tvorby dystrofinu, bylo dosaženo cca 30% normálního množství. Obnovená tvorba dystrofinu vedla ke změně chování mdx myší, jejich reakce ještě nebyly úplně stejné jako u zdravých myší ale hodně se jim přiblížily.
  3. mdx myši mají bodovou mutaci v exonu 23, to znamená, že netvoří dystrofin plné délky, tvorba izoforem Dp140 (tzv. mozkový dystrofin) a Dp71 ale není narušena. Vynechání exonu 23 vede k tvorbě "svalové" formy dystrofinu bez exonu 23. To dokazuje, že v mozku se tvoří i "svalový" dystrofin a má vliv na jeho funkčnost.
  
         Tento výzkum dokázal, že ve zdravém mozku je produkován i dystrofin plné délky, jeho absence nebo nedostatek ovlivňuje emocionální chování a toto chování lze přinejmenším částečně normalizovat genetickou léčbou vedoucí k obnově tvorby "svalového" dystrofinu v mozku.

8.12.2008

• Vědecké přístupy k léčbě Duchenneovy svalové dystrofie
         Dr Scheuerbrandt jednou až dvakrát ročně vydává novou zprávu o stavu vývoje léku proti DMD/BMD. Poslední aktualizace Research approaches for a Therapy of Duchenne Muscular Dystrophy pochází z června 2008. Její český překlad naleznete zde.

18.10.2008

• Účinná obnova dystrofinu pomocí modifikovaných morfolino oligomerů zlepšuje funkci srdce u myší
         V současnosti probíhají klinické testy dvou typů AONů (antisense oligo nukleotidů), amerických morfolin a holandských 2O-metyl AONů zacílených na exon 51. Oba tyto léky jsou schopny pronikat do kosterního svalstva a zajistit obnovu tvorby dystrofinu, ale mají velmi malou schopnost pronikat do srdce. U takto léčených pacientů by se mohlo stát, že se sice zlepší kvalita jejich života ale život sám se zkrátí protože více namáhané neléčené srdce dřív zkolabuje. Proto se oba výrobci paralelně s klinickým ověřováním svých AONů zabývají jejich optimalizací tak, aby dosáhli co nejvyšší účinnosti při pronikání nejen do kosterního svalstva ale i do srdce.
         Tato studie pojednává o výraznem zlepšení schopnosti modifikovaného morfolina pronikat do všech typů svalstva včetně srdce. Modifikace spočívá ve spojení morfolina (PMO) s peptidem schopným vnikat do buněk, takto upravené PMO je označováno jako PPMO. Při pokuse dokázala jediná injece PPMO v dávce 30mg/kg obnovit téměř normální hladinu dystrofinu v kosterním svalstvu přičemž dystrofin byl detekován ve všech (!) analyzovaných svalových buňkách z několika různých svalových skupin kosterního svalstva. Došlo k obnovení tvorby dystroglykanového komplexu. Přesto byl jasný rozdíl mezi svaly zdravých a léčených myší, léčené dystrofické svalstvo mělo velkou variabilitu ve velikosti svalových vláken. V srdci bylo dosaženo kolem 5é% dystrofinu ve většině jeho částí. Stejná dávka PMO dokázala u mdx myší obnovit tvorbu dystrofinu jen v 5% svalových vláken, v srdci dystrofin nebyl vůbec detekován.
         Tříměsíční léčba PPMO 30mg/kg ve čtrnáctidenních intervalech vedla k produkci dystrofinu ve 100% buněk kosterního svalstva včetně bránice a v hladkém svalstvu tenkého střeva, došlo ke zvýšení koncetrace dystrofinu i v srdci a to téměř na normální úroveň ve většině oblastí srdce. Silné produkce dystrofinu bylo dosaženo také ve velkých cévách jako jsou třeba aorta nebo plicní cévy. Tato léčba vedla k výraznému zlepšení svalové výkonnosti a snížení CK.
         Histologické vyšetření jater a ledvin neukázalo žádné patologické změny. Nebyla zjištěna akumulace makrofágů nebo jiných typů buněk imunitního systému ve svalech, nebyly zjištěny protilátky proti PPMO.
  
• Vivo-Morpholinos
         Firma GeneTools se zabývá vývojem a výrobou morfolino antisense oligonukleotidů, které jsou schopny blokovat celé geny nebo jejich části. Pro dosažení dostatečné účinnosti transportu morfolina do různých tkání vyvinula i tkáňově specifické peptidy schopné dostat do různých typů tkání morfolino s vysokou účinností a s co nejmenším ovlivnění zbytku organismu. Výsledek testu morfolina s různými typy peptidů jsou zde. Sloupeček nadepsaný bare je výsledek testu s čistým morfolinem, sloupeček Vivo-Morfolino je výsledek testu morfolina s tkáňově specifickým peptidem pro konkretní tkáň. Pokus byl dělán na zdravých myších a morfolino bylo užito pro odstranění části dystrofinového genu. Čím je sytější černá čára vedle slova "unaffected" tím méně účinné morfolino je, naopak čím tmavší je černá čára vedle slova "Exon-skipped" tím je účinnější. Testy byly dělány pro játra (liver), tenké střevo(small intestine), tlusté střevo(colon), svaly(muscle), slezinu(spleen), plíce(lung), srdce(heart), bránici(diaphragm), kůži(skin), žaludek(stomach) a mozek (brain). Tyto výsledku ukazují, že je možno dosáhnout exon skippingu téměř ve všech tkáních, kde je normálně dystrofin produkován.

4.8.2008

• Nová naděje pro svalové dystrofie
         Italští vědci vyvinuli novou buněčnou terapii, která je nadějí pro lidi trpící pokročilou formou svalé dystrofie. Vědecký tým milánské univerzity, který vede Giulio Cossu, vyvinul metodu, které říkají beranidlová (battering ram) buněčná technika. Tato technika už byla úspěšně otestována na myších. Funguje tak, že odstraňuje překážky, které brání již vyvinuté léčbě pomocí mesoangioblastů zafungovat u pacientů v pokročilém stádiu nemoci. Jak dystrofické svaly stárnou dochází v nich k zjizvení, svaly jsou infiltrovány vazivovými a tukovými buňkami, které brání buňkám při buněčné terapii v pronikání ke svalovým vláknům. "Beranidlové" buňky jsou modifikované fibroblasty. Fibroblasty jsou buňky, které vytváří mezibuněčnou kostru tkání a podílejí se na hojivých procesech.
         Modifikované fibroblasty jsou injikovány do svalů, kde začnou likvidovat vazivovou tkáň, která tvoří podstatnou část svalů. "Beranidlové" buňky redukují přebytečný kolagen, produkovaný vazivovou tkání a obnovují tvorbu cév ve svalech.
         Jakmile je zredukováno zjizvení svalů jsou vědci schopni léčit příčinu problému za pomocí mesoangioblastů. Mesoangioblasty jsou kmenové buňky, keré pomáhají regenerovat svaly tím, že se spojí se svalovými vlákny. Ačkoliv léčba mesoangioblasty byla velmi úspěšná u mladých zvířat selhávala u zvířat v pokročilejší fázi choroby právě kvůli fibróze svalů. "S touto předléčbou jsme dosáhli toho, že léčba pomocí mesoangioblastů funguje na myších v pokročilém stádiu choroby stejně jako u mladých myší." vysvětlil vedoucí San Raffaele Stem Cell Institute v Miláně Giulio Cossu. Přesto ale poznamenal, že před tím než začne klinické testování této dvojité léčby na lidech bude nutno odstranit technické problémy což zabere nějaký čas.
         Podrobné informace o této nové léčebné metodě budou publikovány v příštím vydání mezinárodního vědeckého časopisu Nature Science.

25.3.2008

• Fidelity of Gamma-Glutamyl Transferase (GGT) in Differentiating Skeletal Muscle From Liver Damage
         U DMD dochází k tak velkému zvýšení hodnot jaterních enzymů takže často vzniká podezření, že by mohly být poškozeny i játra. Cílem této práce bylo ověřit, že GGT (gamma-glutamyl transferase) může být použito jako spolehlivý biomarker na rozlišení mezi svalovým a jaterním onemocněním. Pokusu se zúčastnilo 14 chodících a 14 nechodících pacientů z nichž asi polovina brala kortikosteroidy. Přestože u všech bylo zjištěno zvýšení CK 14x až 200x žádný z nich neměl zvýšenou hladinu GGT. Toto zjištění je velmi užitečné i pro budoucí klinické testy protože umožňuje spolehlivě určit hepatotoxicitu léku za situace kdy jiné biomarkery jsou nepoužitelné díky svalové dystrofii.

24.3.2008

• Pat Furlong: Co se stalo s Myodurem?
         Je víc než frustrující dozvědět se o něčem co by mohlo pomoct a pak nic. Čekáte a čekáte, denně sledujete svého syna, jste zvědaví jestli se děje něco co by pro něj mohlo být prospěšné. Několik let se takhle diskutovalo o látce zvané Myodur, pak debaty přestaly a Myodur zmizel z povrchu zemského. Zde najdete informaci o tom jak to vše začalo a jak to dopadlo.
         PPMD je organizace zaměřená na hledání orálně užívaných látek, které by mohlu zpomalit nebo zastavit svalovou degeneraci. Od roku 1999 se zajímáme o inhibitory proteáz a podporujeme jejich výzkum. Právě v roce 1999 jsme se seznámili s Alfredem Stratcherem. MD Dr. Stratcher v té době pracoval s inhibitorem proteáz nazývaným Leupeptin, který zkombinoval s L-karnitinem, tato látka byla nazvána Myodur.
         Když jsme začali přemýšlet o tomto projektu uvědomili jsme si nutnost prozkoumat a porovnat více inhibitorů proteáz včetně Stratcherova Myoduru nebo látky zvané Bowman Birk Inhibitor Compound (BBI-C). S cílem dotáhnout Myodur do fáze klinických testů se Dr. Stratcher spojil s firmou Ceptor. Ceptor začal proces s přípravou na klinickou studii, bohužel, data na zvířatech naznačovala, že Myodur není dostatečně efektivní a Ceptor neměl peníze na další studii.
         To je ta špatná zpráva. Ta dobrá je, že data z testů BBI na mdx myších jsou velmi dobrá. PPMD pokračuje v podpoře výzkumu inhibitorů proteáz, zaměřili jsme se právě na BBI. BBI již prošlo klinickou studií pro léčbu rakoviny krku, nebyly pozorovány žádné negativní vedlejší účinky. National Cancer Institute nám poskytl BBI pro studii a souhlasil s tím, že jej dodá i pro klinickou studii. Ale poskytnuté množství bylo nedostatečné a proto jsme museli najít náhradního dodavatele.
         BBI je látka získaná ze sóje. BBI vyrábí firma Soale ve spolupráci s firmou DuPont. Původně bylo BBI bráno jako potravinový doplněk, ale FDA rozhodla, že je potřeba s tím zacházet jako s lékem. Výrobce se rozhodl nepokračovat kvůli extra nákladům spojeným s překvalifikováním BBI.
         To nás ale nezastavilo. Spojili jsme se s PCT abychom vyřešili problémy s patenty a našli náhradního dodavatele. Abych tuto dlouhou story zkrátila ve spolupráci s Charley's Fund, Nash Avery Foundation and the Jett Foundation jsme identifikovali jiný vhodný přípravek. Je to Haelan 951. Haelan 951 má podobné účinky jako BBI ale bez pořádné klinické studie nejsme schopni stanovit optimální dávku. Navíc, Haelan 951 je velmi drahý (jedna lahvička, která obsahuje dvoudení dávku, stojí 51,-USD, pozn. překl.) a bude velmi obtížné získat finanční krytí zdravotními pojišťovnami. Podpora testů tohoto přípravku ze strany PPMD a dalších fondů trvá, dalším krokem by už měly být klinické testy.
         Kalpain je primární proteáza, která rozkládá svalové buňky. Genetický defekt u DMD/BMD způsobuje snížení pevnosti svalové membrány, následkem toho se do buňky dostává víc vápníkových iontů, které vyvolávají zvýšenou tvorbu kalpainů. Kalpainy jsou v každé tělesné buňce a způsobují jejich degradaci v běžném metabolickém procesu. Pokud je ale  množství kalpainů příliš velké dochází k likvidaci buněk rychleji než k jejich tvorbě. Právě to je to co se děje u DMD.
         Našim cílem je najít orálně užívatelné látky, která zpomalují nebo zastavují svalovou degeneraci, které mají stejný nebo lepší účinek jako steroidy s menšími vedlejšími efekty. Domníváme se, že BBI by mohlo být jedním kouskem této skládačky.
  Pat Furlong
  
  Pat Furlong je zakladatelka a předsedkyně americké organiza Parent Project Muscular Dystrophy a matka dvou již nežijících chlapců s DMD.

11.3.2008

• Jak užívat Protandim
         Vzhledem k tomu, že není příliš mnoho informací o užívání Protandimu český Parent Project vznesl několik dotazů přímo k autoritě v tomto směru nejvyšší: - profesoru McCordovi. Zde jsou jeho odpovědi na naše otázky :
  1. Je lepší užívat Protandim před jídlem nebo po jídle
     Nejlepší je brát Protandim při jídle obsahujícím tuky protože většina aktivních látek je spíše rozpustná v tucích než ve vodě. A je úplně jedno jedno jestli je to před jídlem, během jídla nebo po jídle.Je-li brán několik hodin před jídlem nebo po jídle absorbce je nižší.
  2. Je lepší brát Protandim ráno, v poledne nebo večer?
     Nemyslím, že by na tom moc záleželo. Podávejte jej jak vám to vyhovuje, nejlépe kolem největšího jídla.
  3. Není lepší denní dávku rozdělit například do dvou menších, brát půlku denní dávky ráno a půlku večer?
     Nemáme žádné informace jestli je lepší jedna větší dávka nebo dvě menší dávky. Doporučoval bych to v těch případech, kdy chlapci mívají po větší dávce žaludeční nevolnosti, ale to je velmi řídké.
  4. Co je optimální množství Protandimu vzhledem k váze chlapce a diagoze DMD? Není lepší zvýšit dávku vzhledem k masivnímu zánětu svalů u DMD?
     Myslím, že rodiče mohou zkusit trochu experimentovat. Ať změní trochu dávku a pozorují jaký to bude mít efekt na chlapce. Souhlasím, že větší dávka může pomoci snížit symptomy zánětu.
  5. Máte už výsledky z rozboru krve z pokusu, který proběhl vloni? Je možno z dat, které máte, něco vyvodit?
     Začali jsme už s analýzu vzorků. Problémy při uskladnění a transportu způsobují, že některé vzorky mají zřejmě větší vypovídací hodnotu než jiné. Vkládám naděje do měření osteopontinu, který u chlapců s DMD ještě nebyl měřen. Jakmile budou rozbory vzorků hotové dám vám vědět co ze získaných dat vyplývá.

8.3.2008

• Fáze 2b studie PTC124 pro DMD/BMD
         Na základě informace od MUDr Vondráčka, že ČR bude vybrána jako jedna ze zemí, kde se bude provádět ověřování PTC124 na DMD-BMD pacientech, začaly chodit dotazy rodičů za jakých podmínek budou tyto testy probíhat. Bližší  informace zatím ještě nejsou k dispozici, není ani známo do které fáze bude ČR zapojena. Pokud by to byla fáze 2b, která právě začíná, lze předpokládat, že klinické testy budou probíhat tak jak je popsáno na serveru Clinicaltrials.gov.
         Primárním cílem je sledování účinnosti léku PTC124 na chůzi u pacientů s bodovou mutací. vyhodnocována bude vzdálenost, kterou pacient ujde během šesti minut. Pro účely pokusu bude potřeba najít 165 pacientů z USA, Evropy, Austrálie a Izraele. Pokus začíná v únoru 2008, předpokládaný konec srpen 2010. Účastníci musí být schopni chůze a musí ujít alespoň 75m. Během pokusu budou dostávat po dobu 48 týdnů lék 3x denně. Účastníci budou rozdělěni do tří skupin po 55, v první skupině budou dostávat vysokou dávku léku, v druhé skupině nízkou dávku a v třetí zkupině placebo. Sledováni budou v šetitýdenních intervalech.
         Kritéria pro výběr pacientů jsou následující:
  1. pohlaví mužské
  2. věk 5 let a více
  3. schopnost podepsat informovaný souhlas (v případě pacientů mladších než 18 let podepisuje rodič nebo jiný zákonný zástupce)
  4. DMD/BMD fenotyp na základě typických příznaků: Goweruv manévr při vstávání, hypertrofie lýtek, kolébavá chůze, zvýšené CK
  5. řádně zdokumentovaná prezence bodové mutace
  6. schopnost ujít alespoň 75m během 6ti minut
  7. ultrazvukové vyšetření ledvin
  8. laboratorní vyšetření ledvin, nadledvinek, kostní dřeně
  9. ochota a schopnost přizpůsobit se naplánovaným kontrolám, podrobit se laboratorním testům, restrikcím vyplývajícím z testu, užívat lék podle plánu
  Vylučující kritéria
  1. léčba aminoglykosidovými antibiotiky 3 měsíce před začátkem klinického testu
  2. započetí léčby kortikosteroidy 6 měsíců nebo změna kortikoidové terapie 3 měsíce před začátkem klinického testu
  3. nesmí nastat změna v preventivní léčbě srdce (započetí, změna léku, změna dávkování, přerušení ) 3 měsíce před začátkem klinického testu
  4. léčba lékem warfarin měsíc před začátkem klinického testu
  5. předchozí experimentální léčba pomocí PTC124
  6. známá hypersensitivita na ingredience studovaného léku (Litesse® UltraTM [refined polydextrose], polyethylene glycol 3350, Lutrol® micro F127 [poloxamer 407], mannitol 25C, crospovidone XL10, hydroxyethyl cellulose, vanilla, Cab-O-Sil® M5P [colloidal silica], magnesium stearate)
  7. vystavení se účinkům jiného experimentálního léku 2 měsíce před začátkem klinického testu
  8. závažnější chirurgický zákrok 30 dní před začátkem klinického testu
  9. probíhající imunosupresivní terapie
  10. účast na jiném klinickém pokusu
  11. předpokládaný vážný chirurgický zákrok během dvanáctiměsíčního období, kdy bude probíhat experimentální léčba a její vyhodnocení
  12. nutnost každodenního užívání podpůrných dýchacích přístrojů
  13. clinicky závažná kardiomyopatie
  14. předcházející nebo současné zdravotní problémy (např. psychické problémy, závislost na  drogách, alkoholu, elektrokardiologický nález, jiné abnormality, které by podle názoru odborníků provádějících test PTC124 mohly ohrozit účastníka, zavinit předčasné ukončení testu nebo ohrozit vyhodnocení výsledků)
• Výzkum řídce se vyskytujících chorob na vzestupu
  29.2.2008 byl dnem řídce se vyskytujících chorob. Při této souvislosti natočily Euronews reportáž o řídce se vyskytujících chorobách a výzkumu jejich léčby v EU s předními evropskými odborníky a organizátory Treat-NMD profesorkou Kate Bushby a profesorem Volkerem Straubem. Tato reportáž je zde a lze si ji sputit v šesti evropských jazycích a rusky.

30.1.2008

• Lokální obnova dystrofinu pomocí antisense oligonukleotidu PRO051
         V letech 2006 až 2007 proběhlo v Holandsku první kolo klinických testů s lékem PRO051 na principu antisense oligonukleotidů, který je určen pro delece, které lze dostat do čtecího rámce vynecháním exonu 51. V prosinci 2007 tým Judith C. van Deutekom vydal podrobnou zprávu. Základní informace jsme přinesli již v loňském roce, úplnou zprávu v angličtině přinášíme nyní zde.
• PTC124 zacílené na genetické poruchy způsobené nonsense mutací
         Také o klinických testech s PTC124 jsme již informovali. Úplná zpráva přináší další podrobnosti ale ani ona neobsahuje informaci o tom proč u některých pacientů s bodovou mutací tato léčba nefungeje. Přesto PTC Therapeutics pokračuje v klinických testech dál a v současnosti připravuje II. kolo klinických testů, bližší podrobnosti najdete zde.




Archiv: 2003,   2004,   2005,   2006,   2007,   2008,   2009,   2010,   2011,   2012,   2013,   2014.

© 2014 Parent Project - Česká republika, e-mail: parentproject@parentproject.cz