Výzkum 2010

20.10.2010

• Data prezentovaná na kongresu WMS naznačují, že Ataluren zpomaluje ztrátu schopnosti chůze u pacientů s nonsense mutací u svalové dystrofie typu Duchenne/Becker
         15. října 2010 PTC Therapeutics, Inc oznámila ukončení analýzy fáze 2b- účinnosti hodnoceného léku ataluren. Data naznačují, že hodnocený nový lék Ataluren zpomaluje ztrátu schopnosti chůze u pacientů s nonsence mutací způsobující dystrofinopatii (nmDBMD). Tyto údaje byly prezentovány na mezinárodním kongresu World Muscle Society v Kumamoto (Japonsko) a na jejich základě proběhnou jednání s US Food and Drug Administration (FDA) a vnitrostátními regulačními orgány v Evropě, a to ve čtvrtém čtvrtletí roku 2010.
         Od dokončení fáze 2b studie jsme pilně pracovali s badateli a odbornými poradci. Důkladně jsme analyzovali celý soubor dat. Jsme rádi, že výsledky těchto analýz ukazují, že Ataluren má klinicky významný přínos pro pacienty s nonsense mutací způsobující dystrofinopatii, "řekl Stuart Peltz, Ph.D., prezident a výkonný ředitel PTC Therapeutics. "Zahájili jsme již dialog s regulačními orgány s cílem dostat Ataluren k pacientům.
         Primárním cílem studie fáze 2b byla změna chůze během šesti minut (6MWD) v průběhu 48 týdnů. Data ukázala rozdíl 29.7 metrů (tj. přibližně 97 stop). Jedná se o rozdíl mezi průměrnou změnou 6MWD při porovnávání atalurenu (10 -, 10 -, 20-mg/kg) s placebo ramenem. Tento výsledek je v souladu s rozdílem 30-metrů a průměrnou změnou 6MWD předepsanou v předregistračních testech schválených léků pro jiná onemocnění. Avšak předem specifikovaná statistická analýza si vyžádala opravu a výsledkem byla hodnota p - 0,058.  Výsledky také ukázaly, že není žádný rozdíl mezi vysokou dávkou atalurenu (20 -, 20 -, 40,- mg/kg) a placebem. Oproti placebu došlo ke zlepšení při nízké dávce. Vysoká dávka podle neklinických analýz vykázala tzv. efekt bell-shaped dose response curve (z angl. - křivka reakce na dávku ve tvaru zvonu) a působila nesmyslným tlumením.
         Analýza vytrvalostních testů ukázala 10% zhoršení v 6MWD  u pacietů užívajících ataluren. Ti vykázali statisticky významně pomalejší progrese onemocnění. Během 48 týdnů došlo k progresi pouze u 26% pacientů léčených ataluren (10 -, 10 -, 20-mg/kg) ve srovnání s 44% pacientů léčených placebem (p = 0,039). Analýzy podskupin ukázaly, že průměrné změny 6MWD byly trvale lepší u pacientů léčených atalurenem (10 -, 10 -, 20-mg/kg) než u těch, kterým bylo podáváno placebo (podskupiny se rozlišovaly podle věku, podle užívání kortikosteroidů aj.).
         Bezpečnostní výsledky ukázaly, že ataluren byl obecně dobře snášen a nežádoucí účinky byly podobné u obou léčených skupin. Nikdo z pacientů nepřerušil léčbu z důvodu nežádoucích účinků. Závažné nežádoucí účinky byly vzácné, ale nepovažovaly se za související s atalurenem.
  
  O fázi 2b klinického testu:
  První předregistrační studie u pacientů s DBMD, randomizovaná, dvojitě-slepá, placebem kontrolovaná studie fáze-2b byla zaměřena na zhodnocení bezpečnosti a účinnosti léku ataluren u pacientů nmDBMD. Do studie bylo zařazeno 174 chodících nejméně pět let starých chlapců, a to na 37 místech v Severní Americe, Evropě, Austrálii a Izraeli. Primárním cílovým parametrem byla změna v 6MWD po dobu 48 týdnů. Klinicky významné a platné výsledky o pohyblivosti, 6-minutový test chůze odráží zlepšení v oblasti celkové vytrvalosti a aktivity. Účastníci byli randomizováni do jedné ze tří skupin a denně dostávali:
  - Ataluren (10 mg / kg ráno, 10 mg / kg v poledne, 20 mg / kg večer)
  - Ataluren (20 mg / kg ráno, 20 mg / kg v poledne, 40 mg / kg večer)
  - Placebo (ráno, v poledne, večer)
  ( přeložil: Blažena Kadeřábková )

16.10.2010

• Klinický test ibuprofenu a ISDN
         V dubnu jsme Vás informovali o úspěšném ověření kombinace nesteroidního protizánětlivého nesteroidního léku ibuprofen a zdroje NO izosorbidu dinitrátu (ISDN) při zpomalení progrese DMD. V Itálii proběhlo první kolo klinického testu ibuprofenu a ISDN. Cílem bylo zjistit bezpečnost a účinnost. Testu se zúčastnilo 68 pacientů s DMD, BMD a LGMD. Pacienti dostávali 2x denně 200mg ibuprofenu a ze začátku 1x denně 20mg ISDN, později 2x denně 20mg ISDN. Několik pacientů mělo přechodně snížený krevní tlak a bolesti hlavy, které do týdne po zahájení léčby vymizely, 3 pacienti test ukončili předčasně (srdeční arytmie, kožní problémy). Klinický test prokázal, že kombinace ibuprofenu a ISDN dokázala snížit zánět ve svalech, hladinu CK a celkově zpomalit progresi choroby.
         V současnosti se připravuje II kolo klinického testu. To bude mít 2 fáze. V první fázi se bude hledat nejvhodnější dávka, v druhé fázi se bude nejvhodnější dávka testovat na 96 pacientech. První fáze proběhne pouze v Itálii, bude stát přibližně 100.000€ a bude plně financována italskou organizací Parent Project Onlus . Druhá fáze proběhne pravděpodobně ve více státech, bude stát přibližně 1 milion € a proběhne jen tehdy pokud se podaří sehnat peníze na její uskutečnění.
         ( Uvedené informace pochází od prezidenta Parent Project Onlus Filippo Bucella, plné znění zprávy není zatím určeno ke zveřejnění. Zájemci o bližší informace se můžou ozvat na tento email )

7.9.2010

• Přehled terapeutických přístupů
         Dr Annemieke Aartsma-Rus z Leiden university medical center zveřejnila v červnu prezentaci kde shrnuje medicínské přístupy k léčbě DMD. Největší část prezentace věnuje metodě exon skipping na jejímž vývoji se podílela. Od strany 25 je graficky velmi jasně znázorněn princip fungování metody exon skipping. 79 exonů dystrofinu je rozkresleno tak, aby bylo vidět jak na sebe musí navazovat, na příkladu delece 48-50 je pak ukázáno jak metoda funguje. Kromě toho je z obrázků patrné, že v řadě případů půjde touto metodou léčit i bodové mutace. Například bude-li stopkodon v exonu 36 vyblokováním exonu 36 dojde k navázání exonu 35 přímo na exon 37 a tvorbě zkráceného ale víceméně funkčního dystrofinu.
• Systematické podávání morfolino oligomeru (PMO) AVI-4658 obnovuje tvorbu dystrofinu u chlapců s DMD
         Další velmi pěknou prezentaci o klinickém testu PMO na pacientech s DMD s mutací léčitelnou odstraněním exonu 51 nedávno publikoval profesor Francesco Muntoni. Pacienti byli rozděleni do 6 skupin, každá dostala jinou dávku PMO: 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, 10.0 a 20.0 mg/kg. Lék byl podáván intravenozně 1x týdně po dobu 12 týdnů. Test prokázal bezpečnost a dobrou toleranci léku a závislost účinnosti na dávce. U pacientů, kteří dostávali 0.5 nebo 1.0 mg/kg PMO bylo pozorováno malé množství RNA s vynechaným exonem 51 ale nebyla zjištěna tvorba dystrofinu. U pacientů, kteří dostávali 2.0 nebo 4.0 mg/kg PMO, bylo zjištěno velké množství RNA ale opět bez tvorby dystrofinu. V poslední skupině u pacientů, kteří dostávali 10.0 nebo 20.0 mg/kg PMO, bylo pozorováno velké množství RNA bez exonu 51 a u 3/4 pacientů i tvorba dystrofinu. Na toto téma vznikl i pěkný poster.

24.7.2010

• Vyhodnocení možného synergického efektu kombinované léčby pomocí alfa-metyl-prednisolone a taurinu na myším modelu DMD
         Glukokortikosteroidy jsou jediný klinicky používaný lék na DMD a to přesto, že mají řadu vedlejších negativních účinků. Kombinace glukokortikoidů s dalšími léky může mít synergický efekt a umožnit tak snížit dávku a redukovat vedlejší účinky. V této předklinické studii byl vyhodnocen účinek kombinované léčby pomocí alfa-methyl-prendisolone (PDN) a aminokyseliny taurine. Mdx myši (myší model DMD) dostávaly 1mg/kg/den PDN a 1g/kg/den taurinu buď zvlášť nebo kombinovaně po dobu 4-8 týdnů. Myši byly pravidelně fyzicky zatěžované, efekt léčby byl vyhodnocen jak in vivo tak ex vivo. In vivo každá léčba (PDN, taurin, PDN+taurin)  zvýšila sílu předních končetin, výrazný synergický efekt byl pozorován u kombinované léčby. Ex vivo byl zjištěn pozitivní vliv na metabolismus vápníku, účinek byl větší u kombinované léčby než pro samotný PDN. Koncentrace CK v krevní plasmě se nezměnila, LD u myší léčených taurinem pokleslo, u PDN + taurin pokleslo o něco méně. Závěr této studie je, že kombinace PDN a taurinu má pozitivní vliv na funkčnost svalů, méně evidentní byl vliv na histopatologii a biochemické markery.
  

16.5.2010

• Potravinový doplněk Protandim snižuje hladinu osteopontinu v plazmě a zlepšuje markery oxidativního stresu u dystrofických myší (pdf)
         Hlavním zjištěním této studie je výrazná redukce TBARS (marker peroxidace lipidů membrány), profibrotického faktou OPN (osteopontin) a zvýšení hladiny antioxidačního enzymu PON1. Po šestiměsíční léčbě myší Protandimem hladina TBARS v plazmě byla snížena o 40%, OPN o 50% a PON1 zvýšena o 35%. Dávka, kterou myši  dostávaly ve žrádle odpovídá 1 tabletě protandimu u člověka.
         Užívání Protandimu neodstraňuje příčinu DMD - absenci dystrofinu. Dá se ale předpokládat, že zlepší hojení svalů, zredukuje fibrozu a tím zpomalí progresi DMD.

  Zvětšit (42K) Obrázek 1. Porovnání množství TBARS u 6 měsíců starých myší užívajících Protandim® s kontrolní skupinou ukazuje pokles TBARS o48%

  
  

  Zvětšit (65K) Obrázek 2. Protandim® snižuje množství OPN o 50%, normalizováno na průměrnou úroveň stejně starých myší z kontrolní skupiny.

  
  

  Zvětšit (65K) Obrázek 3. Protandim® zvyšuje PON1 v plazmě o 35%, normalizováno na průměrnou úroveň stejně starých myší z kontrolní skupiny

28.4.2010

• Současné podávání ibuprofenu a NO je účinnou experimentální terapií svalové dystrofie s okamžitou použitelností u člověka
         Současné terapie svalových dystrofií jsou založeny na kortikosteroidech. Závažné vedlejší účinky této terapie odstartovaly několik studií jejichž cílem je vyvinout alternativní strategie. Vzhledem k tomu, že zánět svalů a narušená produkce NO jsou hlavní příčiny patologie u svalových dystrofií, začal tým Emilia Clementi z Itálie studovat efekt kombinované léčby pomocí NO donoru ISDN (izosorbid dinitrát) a nesteroidního protizánětlivého léku ibuprofenu.
         Myši bez α-sargoglykanu (protein svalového transmembránového komplexu) byly 8 měsíců léčeny pomocí ISDN (30mg/kg) a ibuprofenu (50mg/kg) podávaných denně v jídle. Účinky ISDN a ibuprofenu zvlášť byly vyhodnocovány také. Opakovaně byly měřeny účinky léků na pohyblivost myší, funkčnost svalů, zánět svalů, hladinu cytokinů, svalovou regeneraci.
         Kombinace ISDN a ibuprofenu zvyšovala regenerační schopnosti, redukovala odumírání svalových buněk a zánět ve svalech. Svalová funkčnost a odolnost proti fyzické zátěži se po celou sledovanou dobu nezměnila. Účinnost ISDN a ibuprofenu podávaných zvlášťbyla jen přechodná a výrazně nižší než při jejich současném použití.    
         Pokus prokázal, že současné podávání NO a ibuprofenu má u myšího modelu svalové dystrofie synergický efekt a má terapeutický účinek. Protože oba dva léky jsou dlouhodobě používány u lidí a jsou považovány za bezpečné je možno začít s klinickým testováním na pacientech. 
  

22.4.2010

• Zablokování myostatinu může zvětšit objem svalstva
         Biotechnologická společnost Acceleron Pharma provedla první klinické testy léku ACE031, který je potenciální terapií pro DMD. ACE031 je vyvíjen s cílem zajistit nárůst svalové hmoty a sílu svalů pomocí blokace myostatinu.  Test byl proveden na zdravých jedincích a nyní bude zahájeno testování na pacientech s DMD (v Kanadě a Velké Británii). Bližší informace o připravovaném klinickém testu najdete na webu www.clinicaltrials.gov.
         Růst svalů je ovlivněn řadou signálových molekul, které růst buď podporují nebo potlačují. Na povrchu svalových buněk je řada různých receptorů, jedním z nich je receptor ActRIIB (Activin receptor type IIB). Jak ukazuje následující obrázek na receptor ActRIIB se vážou negativní regulátory růstu jako je například protein GDF-8 a zastavují tím růst svalových vláken. ACE031 neutralizuje signálové molekuly a zabraňuje zastavení růstu svalových buněk.
  
  
  
         Je-li takto potlačeno zastavení růstu svalových buněk narostou abnormálně velké svaly. Přirozeně vzniklé mutace vedoucí k nárůstu svalů jsou známy u řady zvířat i u člověka. 
  
  
  
         Výsledky I. kola klinického testu ACE031 na zdravých jedincích jsou velmi povzbudivé. Účastníci testu dostali ACE031 v různých dávkách. U nejvyšší dávky došlo k nárůstu svalové hmoty až o 1kg za 2 týdny po jediné dávce. Přitom bylo ACE031 dobře tolerováno, byly pozorovány jen mírné, přechodné vedlejší účinky. Následující grafy zobrazují nárůst svalové hmoty u osob, které dostávaly placebo (černá), 1mg/kg (červená) a 3mg/kg (fialová).
  
  
         ACE031 stimuluje růst svalů k jejichž úbytku dochází z důvodu různých nemocí nebo stáří. Pro DMD má ještě jednu velmi pozitivní vlastnost: zvyšuje produkci utrofinu, který je podobný dystrofinu a schopný částečně jej nahradit. U mdx myší léčených glukokortikoidy ACE031 zvýšilo objem svalstva, hustotu kostí a snížilo množství tuku. Na následujícím obrázku je snímek dystrofických svalů před a po léčbě ACE031. Vzorek neléčeného svalu je nalevo, léčeného napravo. Světlezelené čáry jsou membrány jednotlivých buněk, čím světlejší membrána je tím víc utrofinu obsahuje. 
  
  
         Více informací naleznete na webových stránkách společnosti Acceleron  Pharma.
  

18.4.2010

• Souhrn výsledků 2b fáze klinického testu Atalurenu
         16. dubna 2010 prezentovala firma PTC Therapeutics na konferenci American Academy of Neurology výsledky klinického testu Atalurenu. Z uvedených výsledků vyplývá, že Ataluren neni schopen zastavit progresi DMD, ale je schopen ji při vhodném dávkování zpomalit. Placebo ani vysoká dávka léku nemají terapeutický efekt, jako nejúčinnější se ukázala nízká dávka léku. Toto není nijak překvapující zjištění, podobně se chová řada léků. V současnosti probíhají další analýzy mechanizmu fungování Atalurenu a dalších léků se schopností potlačit předčasný stop kodon vzniklý bodovou mutací (aminoglykosidová antibiotika). Cílem je porozumět lépe mechanismu potlačení předčasného stopkodonu.
         Na následujícím obrázku je výsledek šestiminutového testu chůze. Z obrázku je jasně vidět, že u žádné skupiny nedošlo ke zlepšení. Pacienti na vysoké dávce Atalurenu a na placebu po 48 týdnech léčby ušli v průměru o 42 metrů méně než na začátku léčby. Pacienti na nízké dávce ušli jen o 13m méně, kolem dvanáctého týdne dokonce vykázali malé zlepšení.
  
   

14.3.2010

• PTC Therapeutics a Genzyme Corporation oznamují předběžné výsledky 2B fáze klinického testu Atalurenu pro nonsense mutace u pacientů s DMD/BMD
         3.3.2010 PTC Therapeutics a Genzyme Corporation oznámili předběžné výsledky 2B fáze klinického testu nově vyvíjeného léku nazývaného Ataluren (dříve PTC124). Základního cíle, to je zlepšení výsledků testu chůze na 6 minut, nebylo dosaženo. Na části pacientůdále probíhá zjišťování účinnosti. Studie dále ukázala, že Ataluren je dobře snášen, žádný pacient nemusel pokus přerušit. Proto bude vývoj a optimalizace léku pravděpodobně dále pokračovat.

1.3.2010

• Naděje pro pacienty s DMD
         Velkou nadějí pro pacienty s DMD je lék ataluren (dříve označovaný jako PTC124). Ataluren by měl pomoci pacientům s bodovou mutací, kterých je asi 13%. Ataluren umožňuje přečíst genenetickou informaci a vytvořit podle ní dystrofin přestože je v genu chyba. Posledního kola klinického testu Atalurenu se zúčastnilo 174 pacientů, kteří dostávali nízkou nebo vysokou dávku léku anebo placebo po dobu 48 týdnů. Pacienti byli testováni na to jakou vzdálenost ujdou během 6 minut, porovnávalo se kolik pacienti ušli před zahájením léčby a kolik po zkončení. Léčba posledního pacienta zkončila 28.2.2010, podle mluvčí PTC výsledky klinické studie by měly být k dispozici brzy. Předpokládaná cena roční dávky léku je $150.000. Ataluren mimo území USA bude prodávat partner PTC firma Genzyme.
• Umělý gen Jazz - transkripční regulátor utrofinu napravuje dystrofickou patologii u mdx myší
         Absence proteinu dystrofin způsobuje Duchenneovu svalovou dystrofii. Protein utrofin je dystrofinu velmi podobný a mohl by jej ve svalových buňkách nahradit. Italský tým z Istituto di Neurobiologia e Medicina Molecolare v Římě vymyslel a odzkoušel novou metodu zvýšení množství utrofinu. Italové vytvořili nový umělý protein ZF ATFs (artificial zinc finger transcription factors), nazývaný Jazz, který je schopen donutit buňky ke zvýšené produkci utrofinu. Jazz byl odzkoušen na transgenních mdx myších - jsou to myši s poškozeným genem pro dystrofin, které jsou ale schopny produkovat protein Jazz. Pokus ukázal, že Jazz je schopen zabránit poškození buněčné membrány a předejít vzniku dystrofie. Tento pokus dokázal, že existuje možnost vytvoření efektivní terapie DMD na bázi upregulace utrofinu. 

1.1.2010

• Klinický test PRO044
         V říjnu 2009 se holandská firma Prosensa Therapeutics domluvila s GSK na spolupráci při komercializaci léků pro pacienty s DMD na principu "exon skipping" a už v prosinci rozjela klinické ověřování nového léku. Lék se jemnuje PRO044, je zacílený na exon 44 a měl by pomoci pacientům s delecemi: 14-43, 19-43, 30-43, 35-43, 36-43, 40-43, 42-43, 45, 45-54. Fáze I/II by měla proběhnout během roku 2010 v USA. Pokud letos proběhne úspěšně závěrečná fáze testu PRO051 a počáteční fáze testu PRO044 dá se předpokládat, že léky zacílené na další exony budou rychle následovat.
• Léčba svalových dystrofií
         Tým profesora Giulio Cossu, který se proslavil pokusy léčit dystrofické psy pomocí kmenových buněk nazývaných mesoangioblasty (psali jsme o tom ve Výzkumu v roce 2006), přichází s novým nápadem jak léčit svalové dystrofie včetně DMD. Tentokrát nejde o léčbu genetické příčiny, jen o kompenzaci některých důsledků svalových dystrofií za pomoci relativně lehce dostupných léků. Zkombinoval protizánětlivé léky jako jsou aspirin a ibuprofen s donory NO jako jsou isosorbid-mononitrat (ISMN) a isosorbid dinitrát (ISDN) a otestoval na myších. Sám žádný z těchto léků neměl znatelný vliv na fyzický stav myší, ale jejich kombinace dokázaly zvýšit výkonnost svalů, snížit CK a zánět ve svalech. Nejlepší výsledky dávala kombinace ISDN a ibuprofen. Tato léčba neni závislá na typu mutace, je dokonce vhodná i pro některé jiné typy svalových dystrofií. Nedokáže sice zastavit progresi choroby progresi choroby nezastaví, ale může zpomalit progresi.
         Podle zatim neoficiálních informací ověřuje tuto metodu léčby DMD Eric Hoffman, Ph.D. z Wellstone Muscular Dystrophy Center a výsledky jeho pokusu by měly být k dispozici již tento rok.