Výzkum 2012

7.10.2012

• Sarepta Therapeutics oznamuje dosažení primárního cíle obnovení dystrofinu a významného klinického účinku při šestiminutovém testu chůze po 48 týdnech léčby lékem Eteplirsen ve fázi IIb studie na pacientech s Duchennovou svalovou dystrofií
         Farmaceutická firma Sarepta Therapeutics (bývalá firma AVI BioPharma) oznámila, že dosáhla primárního cíle ve fázi 2b testu léku na principu exon skipping Eteplirsen  u pacientů s Duchennovou svalovou dystrofií. Bylo dosaženo obnovení tvorby dystrofinu a zlepšení v testu délky chůze na 6 minut.
         Jedna skupina pacientů dostávala Eteplirsen jednou týdně v dávkách 30mg/kg nebo 50mg/kg po dobu 48 týdnů. Touto léčbou bylo dosaženo až 47% dystrofin pozitivních vláken. Druhá skupina byla 24 týdnů na placebu a dalších 24 týdnů na Eteplirsenu opět v dávkách 30mg/kg nebo 50mg/kg. U této skupiny bylo dosaženo až 38.3% dystrofin pozitivních vláken. Pacienti, kteří dostávali od začátku dávku 50mg/kg, byli schopni po 48 týdnech ujít za 6 minut v průměru o 21m dále než na začátku testu. Pacienti, kteří byli prvních 24 týdnů na placebu, se naopak zhoršili a to v průměru o 68.4m.

15.7.2012

• Resveratrol zmírňuje zánět a zvyšuje expresi utrofinového genu u myšího modelu DMD - mdx myší
         Duchennova svalová dystrofie je neléčitelná smrtelná genetické porucha. Zmírnění zánětu nebo zvýšení produkce utrofinu může zmírnit DMD patologii. Resveratrol je schopen redukovat zredukovat zánět a aktivovat utrofinový promotor. Cílem této studie bylo najít nejaktivnější dávku resveratrolu u mdx myší a zjistit jestli tato dávka redukuje zánět a zvyšuje produkci utrofinu.
         Metoda: 5 měsíců staré mdx myši dostávali 0, 10, 100 nebo 500 mg/kg resveratrolu denně po dobu 10 dní. Metodou qRT-PCR byla měřena exprese genu Sirt1, naměřené hodnouty sloužily k určení nejaktivnější dávky. Zánět svalů byl měřen pomocí H&E barviva, CD45 a F4/80 imunohistochemickými metodami. Exprese genů IL-6, TNFα, PGC-1α a utrofinu byly měřeny qRT-PCR a kvantifikovány pomocí metody western blot.
         Výsledky: nejaktivnější byla dávka 100mg/kg, došlo ke zvýšení Sirt1 mRNA 60 ± 10% (p < 0.01), infiltrace imunitních buněk ve svalech klesla o 21 ± 6% (H&E), infiltrace makrofágy klesla o 42 ± 8% (CD45 immunohistochemicky (p < 0.05)), došlo ke zvýšení IL-6 mRNA (247 ± 77%), PGC-1α (27 ± 17%) a utrofinu 43 ± 23% (p ≤ 0.05). Produkce proteinů IL-6, PGC-1α a utrofinu se ale nezměnila.
         Závěr: Resveratrol by mohl být vhodnou terapií pro redukci zánětu svalů u pacientů s DMD.

20.2.2012

• NO donory a nesteroidní protizánětlivé léky jako terapie pro svalové dystrofie
         V této studii byla testována kombinace dvou léků: NO donoru isosorbid dinitrátu (ISDN) a nesteroidního protizánětlivého léku ibuprofen. Test proběhl na pacientech s DMD, BMD a LGMD (2A, 2B, 2C, 2D, 2E a 2I). Hlavním cílem bylo zjistit je-li vzájemná kombinace bezpečná a dlouhodobě tolerovaná. Testu se zúčastnilo 71 pacientů starších šestnácti let, z toho 35 jich dostávalo léky (DMD 10, BMD 7, LGMD 18), zbytek nedostával nic. Test trval 12 měsíců. Dávkování léků vycházelo z doporučení EMA. Pro dospělého pacienta je zde stanovena dávka ibuprofenu 200mg -300mg 2x až 3x denn ě a 20mg - 120mg ISDN denně. V testu bylo použito minimální dávkování 2x200mg ibuprofenu a 20mg ISDN denně. Po 4 týdnech byla dávka ISDN zvýšena na 40mg/den. Kromě toho jako prevenci proti zažívacím problémům pacienti dostávali pantoprazole 20mg/den. Testu se mohli zúčastnit pacienti starší šestnácti let s EF>40% a FVC>40%, bez zažívacích, ledvinových nebo jaterních problemů , migrény a alergií na podávané léky.
         Test dokončilo 28 pacientů. 4 pacienti s LGMD nedokončili test, jeden kvůli bolestem hlavy, další kvůli dermatitidě a 2 pro pocit, že jim léčba nic nepřináší. 3 pacienti s DMD ukončili léčbu předčasně pro tachykardii (příliš rychlý tlukot srdce). Dlouhodobé pozorování pacientů, kteří předčasně ukončili léčbu, neukázalo žádné klinické abnormality. U pacientů, kteří test dokončili, byla sledována činnost srdce, plic, ledvin, jater, krevní obrazne a CK. Také u žádného z těchto pacientů nebyly pozorovány žádné závažné změny. Přesto k drobným změnám došlo: u pacientů s LGMD se mírně zvýšil diastolický tlak, hodnoty ale nevybočily z normálu.
         Ačkoliv vyhodnocení účinnosti léčby nebylo hlavním cílem základní MFM D1 (standardizované testy pro vyhodnocování svalové výkonnosti u pacientů s nervosvalovými chorobami) testy byly provedeny. Během léčby došlo u pacientů ke znatelnému zlepšení. U pacientů s DMD bylo zjištěno, že srdeční funkce byla po dobu léčby stabilní zatímco u neléčených došlo k poklesu srdeční výkonnosti . Další pozitivní změnou bylo omezení zánětu ve svalech, hladina TGF-β klesla přibližně 15x. Sami pacienti udávali větší výdrž a energii. Pokus nebyl proveden na statisticky dostatečném počtu pacientů, aby se dal přesně vyhodnotit účinek léčby, ale přesto tento pokus ukázal, že jistého zlepšení je možno dosáhnout.
         Oba použité léky jsou už dlouho na trhu a nejsou známy závažné vedlejší účinky při dodržení dávkování a oba jsou k dostání v České republice. Ibuprofen je volně v prodeji pod obchodním názvem Ibalgin, ISDN je pouze na předpis a v současnosti je k dostání pod názvem Cardiket Retard. Nezanedbatelnou výhodou léčby pomocí ibuprofenu a ISDN je i cena léčby. Měsíční dávka obou léků při dávkování použitém v uvedeném testu vychází asi na 200Kč.
         Plná verze článku není na internetu zatím volně k dispozici. Pokud o něj máte zájem pište na email: vyzkum@parentproject.cz

3.2.2012

• Dlouhodobá obnova dystrofinu u dystrofických zlatých retrívrů metodou exon skipping prostřednictvím rAAV
         Studie popisuje výsledky léčby dystrofických zlatých retrívrů (GRMD) modifikovanou metodu exon skipping. U původní metody je vynechání potřebného exonu dosaženo podáváním vhodného kousku RNA. Nevýhodou této metody je prakticky nulová obnova tvorby dystrofinu v srdci a nutnost podávat lék v týdenních maximálně dvoutýdenních intervalech. Nová metoda využívá schopnosti modifikovaného viru rAAV proniknout do všech svalových buněk včetně srdce a produkovat tam potřebnou RNA. K otestování byl vybrán zlatý retrívr protože je to největší dostupný zvířecí model DMD, který má podobně jako člověk těžký průběh choroby. Lék byl testován na 9 psech ve dvou různých koncentracích a byl podán jednorázově injekčně. Pokus jednoznačně prokázal obnovu tvorby dystrofinu v srdci u všech testovaných psů, k jeho tvorbě docházelo ještě 13 měsíců po injekci. Účinnost léku byla závislá na dávce, vyšší dávka byla účinnější. Koncentrace dystrofinu byla různá v různých oblastech srdce, v některých oblastech chyběl úplně, celkově byla koncentrace nižší než se předpokládalo, přesto byla u všech psů pozorována zlepšená funkčnost srdce.